Anti-Hav Igm: Kháng Thể Igm Kháng Vi Rút Viêm Gan...

IgM antibodies to hepatitis A virus (anti-HAV IgM) Catalog Number: 11820591160
Hóa chất có thể được sử dụng trên máy: Elecsys 2010, Modular analytics E170, cobas e 411, cobas e 601

Mục đích sử dụng
Xét nghiệm miễn dịch in vitro dùng để định tính kháng thể IgM kháng vi rút viêm gan A trong huyết thanh và huyết tương người. Xét nghiệm được dùng để hỗ trợ phát hiện nhiễm vi rút viêm gan A cấp hay vừa mới mắc phải.
Xét nghiệm miễn dịch điện hóa phát quang “ECLIA” được dùng cho các máy xét nghiệm miễn dịch Elecsys và cobas e.

Tóm tắt
Vi rút viêm gan A là vi rút có chứa RNA nhưng thiếu vỏ bọc. Vi rút này thuộc họ picornaviruses. Cho đến nay, chỉ một kiểu huyết thanh và 7 kiểu di truyền ở người được mô tả. Capsid của vi rút gồm 3 protein (VP1-VP3) hình thành cấu trúc miễn dịch trội trên bề mặt của hạt vi rút, được bảo tồn chặt chẽ giữa tất cả các kiểu di truyền. Sau khi tiêm chủng hoặc bị lây nhiễm tự nhiên, đáp ứng miễn dịch sẽ kháng trực tiếp cấu trúc này.
Viêm gan A là dạng phổ biển nhất của viêm gan do vi rút cấp tính. Nó lan truyền qua đường phân-miệng. Bệnh chưa được biết đến như một bệnh mạn tính cũng như việc tồn tại của vi rút trong cơ thể.
Có thể giả thiết nhiễm viêm gan A cấp tính nếu phát hiện các kháng thể IgM kháng HAV. Kháng thể IgM kháng HAV luôn có thể được phát hiện ngay khi nhiễm, và thường biến mất sau 3 đến 4 tháng.3,4,5 Tuy nhiên, ở một vài bệnh nhân, kháng thể IgM kháng HAV vẫn có thể được phát hiện sau một khoảng thời gian dài.6 Kháng thể IgM kháng HAV rất hiếm phát triển sau khi tiêm chủng.
Các xét nghiệm nhằm phát hiện các kháng thể IgM kháng HAV được sử dụng trong chẩn đoán phân biệt bệnh viêm gan cấp tính nhằm xác định nhiễm viêm gan A.

Nguyên lý xét nghiệm
Nguyên lý xét nghiệm μ-Capture. Tổng thời gian xét nghiệm: 18 phút.
• Thời kỳ ủ đầu tiên: Tiền xử lý 10 μL mẫu thử pha loãng tự động theo tỷ lệ 1:400 (sử dụng Diluent Universal) với thuốc thử kháng thể kháng Fdγ để khóa IgG đặc hiệu với sự hiện diện của kháng thể đơn dòng kháng HAV đánh dấu phức hợp rutheniuma.
• Thời kỳ ủ thứ hai: Sau khi thêm kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng IgM người đánh dấu biotin, kháng nguyên HAV, và vi hạt phủ streptavidin, kháng thể IgM kháng HAV có trong mẫu tạo thành phức hợp bắt cặp với kháng nguyên HAV và kháng thể kháng HAV đánh dấu ruthenium, phức hợp này trở nên gắn kết với pha rắn thông qua sự tương tác giữa biotin và streptavidin.
• Hỗn hợp phản ứng được chuyển tới buồng đo, ở đó các vi hạt đối từ được bắt giữ trên bề mặt của điện cực. Những thành phần không gắn kết sẽ bị thải ra ngoài buồng đo bởi dung dịch ProCell/ProCell M. Cho điện áp vào điện cực sẽ tạo nên sự phát quang hóa học được đo bằng bộ khuếch đại quang tử.
• Các kết quả được xác định tự động nhờ phần mềm bằng cách so sánh tín hiệu điện hóa phát quang thu được từ sản phẩm phản ứng của mẫu với tín hiệu giá trị ngưỡng phản ứng thu được trước đó qua việc chuẩn xét nghiệm.

Thuốc thử - dung dịch tham gia xét nghiệm
Bộ thuốc thử (M, R1, R2) được dán nhãn A-HAVIGM.
M Vi hạt phủ Streptavidin (nắp trong), 1 chai, 6.5 mL: Vi hạt phủ Streptavidin 0.72 mg/mL; chất bảo quản.
R1 Anti-HAV Ab~Ru(bpy)2+3 (nắp xám), 1 chai, 10 mL: Kháng thể đơn dòng kháng HAV (chuột) đánh dấu phức hợp
ruthenium 0.15 μg/mL; kháng thể kháng Fdy người (cừu) 0.04 mg/mL; đệm HEPESb 50 mmol/L, pH 7.2; chất bảo quản.

R2 Anti-h-IgM Ab~biotin; HAV Ag (nắp đen), 1 chai, 10 mL: Kháng thể đơn dòng kháng IgM người đánh dấu biotin (chuột) 0.4 μg/mL; kháng nguyên HAV (canh cấy tế bào), 25 U/mL (đơn vị của Roche); đệm HEPES 50 mmol/L, pH 7.2; chất bảo quản.

A-HAVIGM Cal1 Mẫu chuẩn âm tính 1 (nắp trắng), 2 chai, mỗi chai 0.67 mL: Huyết thanh người, âm tính với kháng thể IgM kháng HAV; chất bảo quản.
A-HAVIGM Cal2 Mẫu chuẩn dương tính 2 (nắp đen), 2 chai, mỗi chai 0.67 mL: Kháng thể IgM kháng HAV (người) khoảng 5 U/mL (đơn vị của Roche) trong huyết thanh người; chất bảo quản.

Thận trọng và cảnh báo
Dùng trong chẩn đoán in vitro.
Áp dụng các cảnh báo thông thường cần thiết cho việc xử lý các loại thuốc thử phòng thí nghiệm.
Loại bỏ các chất thải tuân theo hướng dẫn của địa phương.
Bảng dữ liệu an toàn hóa chất có sẵn để cung cấp cho chuyên viên sử dụng khi có yêu cầu.
Tất cả các sản phẩm từ người đều có khả năng lây nhiễm.
Các mẫu chuẩn (A-HAVIGM Cal1 và A-HAVIGM Cal2) đều đã chuẩn bị kỹ từ máu của những người hiến máu đã được xét nghiệm riêng lẻ và cho kết quả âm tính với HBsAg và kháng thể kháng HCV và HIV.
Các phương pháp xét nghiệm được sử dụng đều đã được FDA chấp thuận hay đã đáp ứng Chỉ thị Châu Âu 98/79/EC, Phụ lục II, Danh mục A.
Huyết thanh chứa kháng thể IgM kháng HAV và kháng nguyên HAV (canh cấy tế bào) bị bất hoạt bằng β-propiolactone và tia cực tím.
Tuy nhiên, không có phương pháp bất hoạt hay xét nghiệm nào có thể loại bỏ hoàn toàn nguy cơ lây nhiễm một cách chắc chắn tuyệt đối, nên xử lý cẩn thận như mẫu bệnh phẩm. Trong trường hợp có phơi nhiễm, nên tuân theo hướng dẫn của cơ quan y tế địa phương.
Không nên sử dụng thuốc thử đã hết hạn sử dụng.
Tránh để các dung dịch thuốc thử và các mẫu (mẫu xét nghiệm, mẫu chuẩn và mẫu chứng) bị tạo bọt.

Sử dụng thuốc thử
Thuốc thử trong hộp thuốc thử sẵn sàng để sử dụng và được cung cấp trong các chai tương thích với hệ thống.
- Máy phân tích Elecsys 2010 và cobas e 411: Các mẫu chuẩn phải đưa về nhiệt độ 20-25 °C trước khi đặt trên thiết bị phân tích để chuẩn. Sau khi sử dụng, đóng ngay nắp chai lại và bảo quản ở 2-8 °C. Do có khả năng xảy ra các hiệu ứng bay hơi, không được thực hiện quá 5 lần quy trình chuẩn trên mỗi bộ chai mẫu chuẩn.
- Máy phân tích MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 và cobas e 602: Ngoại trừ trường hợp cần sử dụng toàn bộ thể tích để chuẩn trên thiết bị phân tích, thông thường nên chuyển phần mẫu chuẩn phụ sẵn sàng để sử dụng vào những chai trống có nắp bật (CalSet Vials). Dán nhãn cho các chai phụ. Bảo quản chai phụ ở 2-8 °C để sử dụng sau này. Chỉ thực hiện một quy trình chuẩn đối với mỗi chai chuẩn phụ.
Máy phân tích tự động đọc mã vạch trên nhãn thuốc thử và ghi nhận tất cả thông tin cần thiết cho việc chạy thuốc thử.
Bảo quản và độ ổn định
Bảo quản ở 2-8 °C. Không trữ đông.
Đặt hộp thuốc thử Elecsys theo hướń g thẳng đứng nhằm đảm bảo tính hữu dụng của toàn bộ các vi hạt trong khi trộn tự động trước khi sử dụng.

Bảo quản mẫu chuẩn theo hướng thẳng đứng để tránh dung dịch mẫu chuẩn dính vào nắp bật.

Lấy và chuẩn bị mẫu
Chỉ những mẫu được liệt kê dưới đây đã được thử nghiệm và được chấp nhận.
Huyết thanh được lấy bằng cách sử dụng các ống chuẩn lấy mẫu hoặc các ống chứa gel tách.
Huyết tương chống đông bằng Li-, Na-heparin, K3-EDTA, và natri citrate.
Tiêu chuẩn: Độ phục hồi nằm trong khoảng 90-110 % giá trị huyết thanh.
Mẫu ổn định trong 7 ngày ở 2-8 °C, 6 tháng ở ‑20 °C. Mẫu có thể được giải đông 5 lần.
Các loại mẫu phẩm được liệt kê đã được thử nghiệm cùng với bộ các ống nghiệm lấy mẫu chọn lọc, có bán trên thị trường vào thời điểm xét nghiệm, ngh˜ia là không phải tất cả các ống lấy mẫu của các nhà sản xuất đều được thử nghiệm. Các bộ ống chứa mẫu của các nhà sản xuất khác nhau có thể làm từ những vật liệu khác nhau có khả năng ảnh hưởng đến kết quả xét nghiệm trong một số trường hợp. Khi xử lý mẫu trong các ống chính (ống chứa mẫu), phải tuân theo hướng dẫn của nhà sản xuất ống.
Ly tâm các mẫu có kết tủa và mẫu đông lạnh trước khi thực hiện xét nghiệm. Không sử dụng các mẫu bị bất hoạt bởi nhiệt. Không sử dụng mẫu thử và mẫu chứng được ổn định bằng azide.
Đảm bảo nhiệt độ của các mẫu bệnh phẩm, mẫu chuẩn và mẫu chứng ở 20-25 °C trước khi tiến hành đo.
Do có khả năng xảy ra các hiệu ứng bay hơi, các mẫu bệnh phẩm, mẫu chuẩn và mẫu chứng trên các thiết bị phân tích phải được đo trong vòng 2 giờ.

Xét nghiệm
Để tối ưu hiệu năng xét nghiệm, nên tuân theo hướng dẫn trong tài liệu này cho các máy tương ứng. Tham khảo hướng dẫn vận hành cho từng xét nghiệm đặc hiệu tương ứng.
Thiết bị tự động trộn các vi hạt trước khi sử dụng. Máy đọc thông số đặc hiệu của xét nghiệm trên mã vạch của thuốc thử. Trong trường hợp ngoại lệ nếu máy không đọc được mã vạch, hãy nhập chuỗi 15 con số vào.
Đưa thuốc thử đang lạnh về khoảng 20 °C và đặt vào khay chứa thuốc thử (20 °C) trên máy phân tích. Tránh tạo bọt. Hệ thống sẽ tự động điều hòa nhiệt độ của thuốc thử và đóng/mở nắp chai.
Đặt mẫu chuẩn lên vùng đặt mẫu. Máy phân tích tự động ghi nhận tất cả thông tin cần thiết cho việc chuẩn xét nghiệm. Sau khi hoàn thành chuẩn, lưu trữ các mẫu chuẩn ở 2-8 °C hoặc loại bỏ chúng (máy phân tích MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 và cobas e 602).
Chuẩn
Thông tin ghi nhận dữ liệu: Phương pháp này đã được chuẩn hóa theo chuẩn tham chiếu của Roche. Các đơn vị được chọn ngẫu nhiên.
Tần suất chuẩn định: Cần thực hiện chuẩn mỗi lô thuốc thử sử dụng A-HAVIGM Cal1, A-HAVIGM Cal2, và hộp thuốc thử mới (ngh˜ia là không quá 24 giờ từ khi hộp thuốc thử được đăng ký trên máy phân tích).
Thực hiện chuẩn lại khi:
• sau 1 tháng (28 ngày) nếu sử dụng các hộp thuốc thử cùng lô
• sau 7 ngày (nếu sử dụng cùng hộp thuốc thử đó)
• khi cần thiết: ví dụ: khi kết quả mẫu chứng PreciControl Anti-HAV IgM nằm ngoài thang
• thường xuyên hơn khi có các quy định liên quan

Kiểm tra chất lượng
Để kiểm tra chất lượng, sử dụng PreciControl Anti-HAV IgM.
Chạy các mẫu chứng với nồng độ khác nhau tối thiểu là một lần cho mỗi 24 giờ khi xét nghiệm vẫn đang sử dụng, một lần với mỗi hộp thuốc thử và sau mỗi lần chuẩn. Khoảng cách giữa các lần chạy mẫu chứng và giá trị giới hạn nên tùy thuộc vào yêu cầu riêng của từng phòng thí nghiệm. Kết quả mẫu chứng phải nằm trong thang.
Mỗi phòng xét nghiệm nên thiết lập các biện pháp hiệu chỉnh nếu các giá trị mẫu chứng nằm ngoài thang đo.
Nếu cần, tiến hành đo lại các mẫu có liên quan.
Lưu ý:
Vì lý do kỹ thuật, phải nhập bằng tay các giá trị đích mới gán cho thuốc thử và mẫu chứng đặc hiệu cho mỗi lô vào tất cả máy phân tích (trừ trường hợp máy cobas e 602). Vì thế luôn xem kỹ tờ giá trị đính kèm trong hộp thuốc thử hay hộp mẫu chứng PreciControl để đảm bảo sử dụng đúng giá trị đích.
Khi sử dụng lô thuốc thử hay lô mẫu chứng mới, máy sẽ sử dụng giá trị gốc được mã hóa trên mã vạch mẫu chứng.
Tuân thủ các quy định chính phủ và hướng dẫn của địa phương về kiểm tra chất lượng.
Tính toán
Máy phân tích tự động tính toán ngưỡng phản ứng dựa trên kết quả đo A-HAVIGM Cal1 và A-HAVIGM Cal2.
Kết quả của một mẫu có thể biểu thị dưới dạng có phản ứng hoặc không có phản ứng cũng như dưới dạng chỉ số ngưỡng (tín hiệu mẫu/ngưỡng phản ứng).
Biện luận kết quả
Mẫu có chỉ số ngưỡng phản ứng ≥ 1.0 là mẫu có phản ứng trong xét nghiệm Elecsys Anti-HAV IgM. Các mẫu này được xem dương tính với kháng thể IgM kháng HAV.
Mẫu có chỉ số ngưỡng phản ứng < 1.0 là mẫu không có phản ứng trong xét nghiệm Elecsys Anti-HAV IgM. Các mẫu này được xem âm tính.
Yếu tố hạn chế - ảnh hưởng
Xét nghiệm không bị ảnh hưởng bởi vàng da (bilirubin < 855 μmol/L hoặc < 50 mg/dL), tán huyết (Hb < 1.09 mmol/L hoặc < 1.75 g/dL), lipid huyết (Intralipid < 2000 mg/dL) và biotin (< 205 nmol/L hoặc < 50 ng/mL).
Tiêu chuẩn: Chỉ định đúng mẫu âm tính và dương tính.

Ở bệnh nhân dùng liều cao biotin (ngh˜ia là > 5 mg/ngày), không nên lấy mẫu cho đến ít nhất 8 giờ sau khi dùng liều biotin cuối.
Kết quả xét nghiệm không bị nhiễu bởi các yếu tố thấp khớp với nồng độ lên đến 3200 IU/mL.
Hiệu ứng mẫu phẩm có nồng độ cao không gây kết quả âm tính giả với xét nghiệm Elecsys Anti-HAV IgM.
Thử nghiệm in vitro được tiến hành trên 18 loại dược phẩm thường sử dụng. Không có hiện tượng nhiễu tới xét nghiệm.
Trong một số hiếm trường hợp, nhiễu có thể xảy ra do nồng độ kháng thể kháng các thành phần miễn dịch, kháng streptavidin hay ruthenium quá cao của mẫu phẩm phân tích.
Xét nghiệm đã được thiết kế phù hợp để giảm thiểu các hiệu ứng này.
Với mục tiêu chẩn đoán, kết quả xét nghiệm cần được đánh giá kèm theo bệnh sử, thăm khám lâm sàng và các phát hiện khác.
Pha loãng
Sử dụng Diluent Universal để tiền pha loãng mẫu tự động. Cũng có thể áp dụng nếu cần pha loãng mẫu thêm.

http://kimhung.vn/vi/shops/Bang-chi-dau-xuong-Elecsys/Hoa-chat-mien-dich-Roche-1710/ 

TÀI LIỆU ANTI - HAV IGM